糖原 PAS 染色试剂盒(细胞专用)
糖原 PAS 染色试剂盒(细胞专用)
糖原 PAS 染色试剂盒(细胞专用)
(Periodic Acid-Shiff stain Assay)
使用说明
产品简介
糖原 PAS 染色(Periodic Acid-Schiff stain)主要用来检测组织中的糖原或其他多糖类物质,是病理学中常规的染色方法之一。随着医学实验技术的发展,糖原染色的应用范围更加广泛,比如,可以用以证明与鉴定细胞内空泡状的性质,心肌病变及其他心血管疾病的诊断,糖原累积病的诊断和研究,糖尿病以及某些肿瘤的诊断等领域。还可以观察肾小球基底膜、结肠杯状细胞、中性粘液物质、阿米巴滋养体和霉菌的着色等。该试剂盒的主要原理是,过碘酸是一种强氧化剂,它能够将多糖分子中相邻的 1,2-乙二醇基,使之氧化变为二醛基,醛基与 Schiff 试剂能够结合成一种品红化合物,产生紫红色,定位于胞浆上。
由于高碘酸还可以氧化细胞内其他物质,使用时应注意选择好高碘酸的浓度和氧化时间,使氧化控制在即能把乙二醇基团氧化成醛基,又不至于过氧化,这是很关键的步骤。
糖原 PAS 染色试剂盒(细胞专用)经过多次优化,大大增强了染色的效果,操作简便快捷,性能稳定。氧化剂、苏木素浓度更低,更适用于细胞、超薄组织切片染色,且无须盐酸乙醇分化步骤。该试剂盒仅适用于科研领域,不得应用于临床检验。
产品组分
编号 |
组分 |
C00201 |
C00202 |
|
5×20 ml |
5×50 ml |
|||
试剂(A) |
固定液 |
20 ml |
50 ml |
|
试剂(B) |
氧化剂 |
20 ml |
50 ml |
|
试剂(C) |
Schiff 氏溶液 |
20 ml |
50 ml |
|
试剂(D) |
亚硫酸钠溶液 |
20 ml |
50 ml |
|
试剂(E) |
苏木素溶液 |
20 ml |
50 ml |
使用注意事项
1、氧化剂氧化时间不宜过久,氧化温度以 18~22°C 最佳。
2、氧化剂和 Schiff 氏溶液应置于 4°C 密闭保存,使用时避免接触过多的阳光和空气。使用前最好提前取出恢复至室温后,避光暗处使用。
3、氧化剂和 Schiff 氏溶液的作用时间非常重要,依据切片的厚薄、组织的类别等因素决定。
4、如常规组织切片染色,建议采购糖原 PAS 染色试剂盒,因为其氧化剂和苏木素溶液的浓度相对较高。
5、为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
实验步骤(仅供参考)
1、细胞、骨髓涂片用 PAS 固定液固定 10~15 分钟。
2、水洗、晾干。
3、置于氧化剂中,室温(18~30°C)氧化 15~20 分钟。
4、自来水冲洗两次,再用蒸馏水浸洗 2 次。
5、样本放入 Schiff 氏溶液,置于室温(18~30°C)阴暗处,浸染 10~20 分钟。
6、亚硫酸钠溶液滴洗两次,每次 2 分钟。
7、流水冲洗 2 分钟。
8、样本置于苏木素染色液中,染细胞核 1~2 分钟。
9、自来水冲洗、晾干、镜检。
染色结果分析
PAS 反应阳性物质 |
红色或紫红色 |
细胞核 |
蓝色 |
细胞质 |
深浅不一的红色 |
备注:颜色深浅很大程度上取决于在氧化剂溶液和 Schiff 氏溶液中作用时间的长短。
阴性对照(可选):
1、 取淀粉酶 1g 溶解于 PBS(pH5.3)100ml,处理 30-60 分钟,与其他切片共同入氧化剂。结果应为阴性。
2、(备选方案)取唾液片(过滤后用)处理 30-60 分钟,与其他切片共同入氧化剂。结果应为阴性。
3、(备选方案)如果对照片采用其自身样本,对照片不经过氧化剂这一步,直接入Schiff 氏溶液,结果应为阴性。